近日，动卫所在微生物学期刊Frontiers in Microbiology（二区，IF=5.2）发表了题为“Pseudorabies gD protein protects mice and piglets against lethal doses of pseudorabies virus”的研究性论文。该研究表明哺乳动物细胞（HEK 293T）表达系统产生的gD蛋白具有良好的免疫原性，能刺激小鼠和仔猪体内产生高水平的抗伪狂犬病毒特异性抗体和中和抗体，可以保护其应对致死剂量的伪狂犬病毒攻击，对新型伪狂犬疫苗的开发具有重要意义。动卫所与华南农业大学联合培养的博士研究生赵梦坡、动卫所陈晶副研究员、罗胜军副研究员为论文共同第一作者，华南农业大学袁子国教授和动卫所王晓虎研究员为论文共同通讯作者。

       伪狂犬病毒株系的不断进化，使得研究人员不断在探索新型疫苗的研发。与原核表达相比，哺乳动物细胞能正确处理自身表达的蛋白质和外源蛋白质，是体外获得高活性蛋白质的首选表达系统。研究小组与南方医科大学李红卫教授团队合作，利用HEK 293T表达系统，对分泌表达在HEK 293T细胞上清中的gD蛋白进行纯化及鉴定。实验结果表明，gD蛋白可以刺激小鼠和仔猪产生高水平PRV-HY特异性抗体和中和抗体。用10³TCID₅₀剂量的PRV-HY对小鼠进行攻毒，gD蛋白免疫组的所有小鼠均存活；用10⁷TCID₅₀剂量的PRV-HY对仔猪进行攻毒，gD蛋白免疫组的所有仔猪均存活，且无典型的临床症状。这表明该gD蛋白可诱导小鼠和仔猪机体产生的坚强的免疫。此外，gD组仔猪鼻拭子和肛拭子中的病毒基因拷贝数明显低于商品化疫苗组，且对环境的排毒周期更短（图1）。

图1攻毒后仔猪排毒量、组织病毒含量和存活率

       与商品化疫苗组相比，gD免疫组仔猪淋巴结、肺、脾、肝、肾的病理变化较少，组织中感染PRV-HY的阳性细胞较少（图2）。主要原因在于gD蛋白能迅速诱导宿主机体产生较高水平的中和抗体。另一方面，ISA 201佐剂能有效刺激宿主产生强大的粘膜免疫，与gD蛋白具有一定的协同作用。该研究结果为开发一种新型猪伪狂犬基因工程亚单位候选疫苗奠定了基础。

图2 攻毒后仔猪组织病理变化和HE染色

       本研究得到了广东省科技计划项目（2021B1212050021）、“十四五”国家重点研发计划（2021YFD1801400）以及广东省农业科学研究院协同创新中心项目（XTXM202202）等支持。

       原文链接：https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1288458